一、实验性结肠炎动物模型实验准备
1、实验动物:C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每组至少8-10只小鼠。
2、造模试剂:DSS,Mw 36000-50000,含硫量17-20%。
3、DSS浓度:急性期模型通常为3-5%,慢性期模型通常为1-3%;可根据实验需求及动物类型摸索浓度。该浓度为质量体积比,使用饮用水配置后,过滤除菌。
二、实验性结肠炎动物模型模型构建
慢性与急性结肠炎模型的构建时间分别为:8天与50天,使用DSS浓度为3-5%和1-3%,之后脱颈,取肠道组织,进行相应病理染色。
三、如何评价造模是否成功
1、疾病活跃指数评分:
从三个方面进行评估打分,分别为体重、粪便粘稠度、粪便潜血等指标。
2、组织学变化评分:
- 溃疡形成个数;
- 上皮细胞变化;
- 炎症浸润;
- 淋巴结形成:组织学分析的标准方法为HE染色。
3、结肠长度:
急性结肠炎模型中,笛8天可检测到结肠长度缩短:慢性结肠光模型中,结肠长度缩短更加明显