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原位杂交技术服务

简要描述：原位杂交指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。上海伊莱博于临床前药效学CRO实验，有着多年的原位杂交技术服务的经验

  • 更新时间：2026-03-21
  • 厂商性质：代理商
  • 访  问  量：1373

详细介绍

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原位杂交实验步骤

原位杂交天进行重新水化和固定、预杂交、杂交。

原位杂交第二天进行1将探针回收，放千-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)2加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1号

升，60℃，放置30分钟，重复一次。3置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。4置换0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分钟

重复一次。5用MABT洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。6室温下加1ml1:2:7溶液，时间为一小时。 7 按1:

3000的比例在1∶2:7溶液中加入酶连地高XIN抗体，4C 冰箱过夜。

原位杂交第三天进行1)用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mIMABT置换

25分钟，再用1mIMABT溶液置换，一小时以上，用1mlMABT溶液置换，25分钟。2)用1ml 1mM**米唑的Stainino

buffer洗一次，每次放置五分钟。3)将胚胎转入十六孔板中，吸去staining buffer.加上300ulBM Purple AP Substrate(底

物，用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。4)每隔一小时观察胚胎是否开

始显色5)将显色的胚胎中的底物吸出，用PBST洗两三次后加上4%多聚.甲醛固定，拍照。6)4C冰箱保存。






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