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流式检测实验服务

简要描述：流式检测实验服务是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针?？梢约觳庀赴⒆橹虼炕南吡Ｌ迥さ缥?。在线粒体膜电位较高时，Jc-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时Jc-1为单体，可以产生绿色荧光。

  • 更新时间：2026-03-20
  • 厂商性质：代理商
  • 访  问  量：1376

详细介绍

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一、细胞周期检测（PI 单染）

  • 原理：PI 嵌入 DNA，荧光强度反映 DNA 含量，分 G0/G1、S、G2/M 期

  • 用途：药物对细胞增殖、周期阻滞的影响

简要步骤

  1. 细胞消化、70% 乙醇 4℃ 固定过夜

  2. PBS 洗，加 RNase A 37℃孵育

  3. 加 PI 染色，避光 30min

  4. 上机检测，Modfit 或 FlowJo 分析周期分布

论文写法
细胞经不同处理后，70% 冰乙醇固定，RNase 消化后 PI 染色，流式细胞仪检测 DNA 含量，分析细胞周期各时期分布比例。

二、细胞凋亡检测（Annexin V-FITC/PI 双染）

  • 原理：凋亡早期膜外翻结合 Annexin V，晚期坏死 PI 入核

  • 结果：Q3 正常，Q4 早期凋亡，Q2 晚期凋亡 / 坏死

步骤

  1. 收集细胞（上清 + 贴壁一起收）

  2. Binding buffer 重悬

  3. 加 Annexin V 和 PI，避光 15min

  4. 上机，1h 内完成

论文写法
采用 Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡，流式细胞仪分析早期凋亡率与总凋亡率。

三、ROS 活性氧检测

  • 探针：DCFH-DA

  • 荧光：绿色荧光强度 ∝ ROS 水平

步骤

  1. 细胞加 DCFH-DA，37℃ 孵育 20–30min

  2. 洗细胞，流式上机测绿色荧光

论文写法
以 DCFH-DA 为荧光探针检测细胞内 ROS 水平，流式细胞仪测定平均荧光强度以反映 ROS 相对含量。

四、线粒体膜电位（MMP）

  • 探针：JC-1

  • 红绿荧光比：红色↓、绿色↑ → 膜电位下降（凋亡相关）

论文写法
采用 JC-1 染色检测线粒体膜电位，流式分析红绿荧光比值变化。

五、细胞表面标志物 / 蛋白表达

如：CD44、CD133、Nestin、Ki67、α-SMA、紧密连接蛋白等

  • 一抗直接 / 间接标记荧光

  • 设同型对照

论文写法
细胞经固定破膜（或活细胞）后，荧光标记抗体避光染色，流式检测阳性细胞比例及平均荧光强度。

六、钙离子浓度（Ca2?）

探针：Fluo-3/AM、Fura-2
多用于神经元、心肌细胞、内皮细胞


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