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Von Kossa染色

简要描述:Von Kossa染色是一种用于检测组织中钙盐的经典方法,特别适用于矿化结节的染色。在染色过程中,首先将矿化基质中的磷酸盐和碳酸盐转变为磷酸银和碳酸银,然后通过使用日光、紫外线或强还原剂,如甲醛,将这些银盐还原为黑色的金属银。这种反应使得钙盐沉积的区域在染色过程中呈现黑色或棕黑色,而细胞核则呈蓝色,背景则呈红色。

  • 更新时间:2026-03-20
  • 厂商性质:代理商
  • 访  问  量:935

详细介绍

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一、原理

银离子(Ag?)与组织中的磷酸钙 / 碳酸钙发生置换反应,生成磷酸银 / 碳酸银,经光照或还原剂显影后形成棕黑色沉淀。

二、适用样本

  • 细胞钙化染色(钙化 VSMC、成骨细胞矿化结节

  • 组织切片:肾、血管、心脏ban膜、骨、软骨、肿瘤


三、试剂配制(常用)

  1. 5% 硝suan银溶液(避光现配)

  2. 5% 硫代硫suan钠(定影液)

  3. 核固红 / 中性红(复染细胞核,可选)


四、细胞爬片 Von Kossa 染色步骤

  1. 细胞爬片用4% 多聚甲醛固定 15 min

  2. PBS 轻洗 2 次

  3. 滴加 5% AgNO? 完quan覆盖样本

  4. 紫外照射 / 强光照射 15–30 min(出现黑色即可)

  5. 去离子水洗去多余银液

  6. 5% 硫代硫suan钠处理 2 min 定影

  7. 流水冲洗,核固红复染 5 min(可?。?/p>

  8. 水洗、脱水、透明、封片

  9. 镜检:钙沉积呈黑色 / 棕黑色


五、石蜡组织切片 Von Kossa 步骤

  1. 脱蜡至水:二甲苯→梯度酒精→水

  2. 蒸馏水漂洗

  3. 5% 硝suan银避光浸染 30–60 min

  4. 紫外 / 强光显色至出现黑色

  5. 蒸馏水洗涤

  6. 5% 硫代硫suan钠定影 2–3 min

  7. 流水冲洗 5 min

  8. 核固红复染细胞核(淡红色)

  9. 脱水透明封片


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