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磁珠分选细胞实验

简要描述：MACS分选是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在分选柱内，而无该种表面抗原的细胞由于不能与连接有磁珠的特异性单抗相结合而没有磁性，不在分选柱内停留，进而使细胞得以分离。分为有柱式分选和无柱式分选。

  • 更新时间：2026-03-20
  • 厂商性质：代理商
  • 访  问  量：1293

详细介绍

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（1）有柱式分选-阳性分?。ù胖楸昙堑南赴康南赴?/span>

①  磁珠标记：样品与磁珠孵育15min左右；

②  阴性组分先行流出：孵育后的样品过柱处理，标记磁珠的细胞在磁场的作用下吸附到MACS分选柱子上，没有被标记的细胞（阴性组分）先行流到试管中；

③ 洗脱阳性组分：把MACS分选柱子从磁分选器上拿下来，这时磁珠是没有磁力的，故洗脱获得阳性组分，收集后用于做后续实验。


一、基本原理

  • 用特异性抗体标记磁珠结合目标细胞

  • 通过磁场分离：标记细胞被吸附在管壁，未标记细胞流出

  • 两种策略：

    1. 阳性分选：直接选目标细胞（纯度高）

    2. 阴性分选：去除杂细胞，保留目标（活性更好）

二、常用样本类型

  • 小鼠脾脏、淋巴结、胸腺

  • 外周血（PBMC）

  • 骨髓

  • 肺 / 脑 / 肿瘤组织单细胞悬液

三、标准实验步骤（通用版）

1. 制备单细胞悬液

  • 组zhi剪碎 → 研磨 / 滤网过滤 → 离心

  • 红细胞裂解（脾脏 / 血样本必须）

  • 重悬于分选缓冲液（PBS+0.5%BSA+2mMEDTA）

  • 计数，调整细胞浓度

2. 磁珠标记

  • 取 10? 细胞，离心弃上清

  • 加入磁珠抗体，4℃ 避光孵育 15–20 min

  • 每 1–2 mL 缓冲液洗涤，离心去未结合磁珠

3. 磁场分选

  • 细胞重悬后加入分选柱 / 分选管

  • 置于磁力架上

  • 收集流出液（阴性组分）

  • 移出磁力架，用缓冲液冲洗，收集洗脱液（阳性组分）

4. 质控与后续实验

  • 流式细胞术检测纯度

  • 台盼蓝测活率

  • 可直接用于：培养、刺激、WB、qPCR、测序等



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