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实时荧光定量PCR服务

简要描述：实时荧光定量PCR服务实时荧光定量PCR技术与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。

  • 更新时间：2026-03-20
  • 厂商性质：代理商
  • 访  问  量：1589

详细介绍

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一、核心流程（标准 4 步法）

  1. 总 RNA 提取
    Trizol 法或试剂盒，测浓度与纯度

    • OD260/280：1.8–2.1 合格

  2. 反转录（cDNA 合成）
    RNA → 反转录酶 → cDNA
  3. qPCR 扩增
    常用体系：

    • 2×SYBR Green Mix

    • 上游引物 + 下游引物

    • cDNA 模板

    • 补水至 20 μL

反应程序：

  • 95℃ 30s

  • 95℃ 5s → 60℃ 30s，40 个循环

  • 熔解曲线

  1. 数据分析

    2?^ΔΔCt 法

    内参基因：β-actin、GAPDH、18S

二、结果怎么表达

  • mRNA 相对表达量

  • 目的基因 / 内参基因

  • 以对照组为 1 进行归一化

四、常用的基因分

  • 炎症：TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1

  • 纤维化：TGF-β1、α-SMA、Col1A1、FN

  • 凋亡：Bax、Bcl-2、Caspase3

  • 氧化应激：Nrf2、HO-1、NQO1

  • 干性标志物：Nestin、SOX2、Oct4

  • 肾损伤：KIM-1、NGAL



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